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  • 研究表明仔豬處理液中豬藍耳病病毒的檢出率更高,且更省時省力省錢!

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    • 日期: 2018-07-11
    • 來源: 碩騰豬業

    處理液主要指的是仔豬閹割和斷尾時的漿液性滲出(包含血液和血清)。有研究表明,處理液中PRRSV-RNA的檢出率比血清中高(Lopez et al., 2018)。

    介紹

    PRRS對美國每年造成的經濟損失超過10億美金,打破傳播循環,生產PRRSV陰性的斷奶豬是PRRS防控和清除的里程碑。

    目前美國在繁殖豬群中監測PRRSV的工業標準包括每月從30個隨機選擇的斷奶仔豬(5頭合成一份)中檢測血清樣品中的PRRSV RNA(6個PCR反應)。

    從仔豬中采集血液十分耗時,需要兩個得到良好培訓的人員,并會引起仔豬的應激。這些缺點,限制了該方法的使用。

    2010年,開始使用口腔液監控豬群的健康情況。然后現實中很難采集哺乳仔豬的口腔液。

    因此本文主要探索商品化豬群的處理液采集以及其在PRRSV監控中的應用。

    處理液的收集步驟

    1、通過將一次性塑料袋放置于干凈的塑料桶中(圖1-1)。

    2、然后用一次性紗布(即奶酪布)覆蓋桶的頂部來收集處理液。紗布形成凹陷,用橡皮筋固定于塑料桶上面(圖1-2)。

    3、采集仔豬閹割和斷尾的組織,放入紗布,然后將紗布連同組織取下(圖1-3)。

    4、 收集處理液(圖1-4),然后將處理液從塑料袋轉移到無菌的50毫升錐形離心機塑料管中(圖1-5)。記錄本次處理液來自哪些仔豬。

    圖1  處理液的收集步驟(Lopez et al., 2018)

    圖1  處理液的收集步驟(Lopez et al., 2018)

    處理液在PRRSV監測中的應用評估

    1、實驗設計

    從四個哺乳到斷奶的豬場采集12組樣品,采樣時間距最近一次PRRS暴發時間不等,最長的是27周。每一組樣品包含當天所有處理仔豬的處理液。30頭仔豬的血液采集自同一群體的病弱和生長過慢的仔豬,包含雄性和雌性。所有樣品都送到愛荷華州立大學進行常規的PRRSV的RNA檢測。對處理液和血清中PRRSV進行測序。

    2、結果

    每一個實驗組在處理仔豬時(去勢和斷尾)時采集的處理液的體積如表1所示。每一窩的平均的處理液采集量為2.17mL,每頭仔豬的平均采集量是186μL(0.186mL)。

    表1 每一個實驗組在處理仔豬時(去勢和斷尾)時采集的處理液的體積(Lopez et al., 2018)

    表1 每一個實驗組在處理仔豬時(去勢和斷尾)時采集的處理液的體積(Lopez et al., 2018)

    12組處理液樣品中10份為PRRSV陽性(Ct值≥37為陰性)(83.33%),PRRSV陽性樣品的Ct值從22到35不等。對應血清中,只有8份是陽性(66.66%)(每一組血清有一個血清集合為陽性,就判定對應的組別為PRRSV陽性;每一組包含30頭仔豬,每五份混合為一份)。處理液和血清中PRRSV毒株序列完全相同都為野毒株。

     表2 處理液和對應血清樣品中的PRRSV 定量RT-PCR檢測結果,和PRRS暴發時間和采樣的間隔時間及全群免疫MLV或者FVE(臨床野毒暴露)的周數(Lopez et al., 2018)

    表2 處理液和對應血清樣品中的PRRSV 定量RT-PCR檢測結果,和PRRS暴發時間和采樣的間隔時間及全群免疫MLV或者FVE(臨床野毒暴露)的周數(Lopez et al., 2018)

    討論

    采集處理液需要十分注意生物安全,不能讓環境中的物質污染處理液。處理液與北美繁殖群標準的PRRSV檢測方法相比檢出率更高,可能與處理液采樣的群體更大更方便相關。該方法不僅省時,還比標準方法省錢。

    每個月進行標準的血清學方法檢測30頭仔豬的血清需要花150美金,對應的處理液可以檢測6次,涵蓋幾百頭仔豬。另外,一個2500頭母豬的豬場,每周斷奶1550頭,產活仔數大概是1650頭,每周用處理液檢測大概花費100美金(每周四個處理液樣本)。使用北美繁殖群PRRSV檢測標準每周檢測同等規模的豬只的花費是8250美金(每5份混合在一起,需要330個PCR反應,每個25美金)。

    無論采取怎樣的采樣策略,更頻繁的檢測更多的豬只能幫助豬場更敏感的檢測PRRSV和其他病原。從而幫助豬場盡快檢測到PRRS的暴發,在低流行水平檢測到病原,并進行防控。

    盡管如此,還需進一步評估處理液檢測PRRSV和其他病原在豬群水平的敏感性。

    啟示

    1、處理液主要指的是仔豬閹割和斷尾時的漿液性滲出。臨床條件下,豬場工人能很方便的收集處理液。

    2、過收集和監測處理液,能夠更頻繁的檢測更多的豬只是否感染PRRSV。

    3、處理液是疾病檢測系統的重要提升?梢栽鲞MPRRSV的防控和清除項目的進展。

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